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Bioss講堂|Streptavidin-Biotin系統
發表者:北京博奧森生物      發表時間:2018-9-30

簡介


鏈霉親和素(Streptavidin, SA)是由鏈霉菌分泌的一種大約55 kDa的蛋白,生物素(Biotin)是分子量僅244的小分子。SA和Biotin具有非常獨特的親和性,其解離常數Kd≈10?14 mol/L,甚至高于抗原-抗體,是自然界中最強的非共價連接之一。它們形成的復合物非常穩定,可以像“生物膠水”一樣將需要偶聯、固定的分子、標簽或支持物連接在一起,方便而不易解離,因而廣泛用于生物學研究中。



應用舉例

  • Biotin分子量很小,對被標記的抗體或蛋白構象影響幾乎可以忽略,保持了抗體或蛋白的天然活性。用多種生物素標記抗體與血液樣本作用后,利用偶聯有SA的磁珠可結合標記抗體,這常用于磁珠法對特定細胞進行負選的實驗中;

  • 細胞結合biotin標記抗體后,可利用包被SA的熒光膠珠進行細胞分選;

  • Biotin標記的抗體或蛋白還可以偶聯在包被SA的基片上,制成抗體或蛋白芯片;

  • 利用SA標記熒光素,可與biotin標記的抗體結合,這樣就形成了一個帶熒光標簽的抗體。這樣可以方便地選擇和更換不同的SA標記產品對抗體進行標記,而不需購買許多標記抗體;

  • Biotin標記的蛋白或小分子可用于研究蛋白-蛋白、蛋白-小分子相互作用,比如用于IP實驗中;

  • Biotin還可以標記DNA,用于研究轉錄因子。

注意事項

  • 天然樣本中可能會含有內源性biotin,在IHC等實驗中可能造成假陽或高背景,應用封閉或高溫法消除;

  • 高濃度SA在中性條件下可能會聚沉,尤其當溶解凍干品時。可考慮使用偏堿性(pH8.5)溶液制備為2×工作液。




Bioss鏈霉親和素標記產品


貨期

  1. 包括定制標記在內所有產品7-10天內發貨,新鮮制備以保證熒光產品在用戶手中更長的有效期;

  2. 小分子多肽和化合物因分子量較小,標記和純化需要特殊處理,價格和標記周期根據樣品特性而定。



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